<p />一、鏡檢法 <br />（一）取糞便加約十倍量之百分之○．五胰蛋白脢（Trypsin） 溶液後置 室溫三十至六十分離並偶而搖動，促其消化，消化液經紗布過濾， 濾液以三千至四千轉（30004000 rpm）遠心分離三十分鐘，取沉 澱物作塗抹片標本。再以抗酸性菌染色法（Ziehl-Neelsen 法）染 色，鏡檢；或取直腸黏膜塗抹於玻片上，以抗酸性菌染色法（Aura mine-0 法）染色六分鐘，再以百分之○．一高錳酸鉀液脫色製成 染色標本，以螢光顯微鏡鏡檢。 <p />二、培養法 <br />（一）取糞便一公克，加約四十公撮之百分之五草酸或百分之四氫氧化鈉 溶液，混合均勻後，置於細長量筒中，靜置三至四分鐘，取上清液 約十五公撮置於攝氏三十七度恆溫水槽內三十分鐘，再以細目金屬 網過濾，濾液以三千至五千轉（30005000 rpm）遠心分離三十分 鐘，其沉渣與少數蒸餾水混合均勻後接種於副結核菌分離用培養基 斜面，並以橡皮塞密封，置於攝氏三十七度恆溫箱中培養三個月。 <br />（二）取腸管洗去腸內容物，以刀或玻片刮取腸黏膜，將腸黏膜或腸間膜 淋巴結切細後，加十倍量之百分之○．五胰蛋白脢溶液，置室溫三 十至六十分鐘，其沉渣加二至三倍之百分之四氫氧化鈉液混合後， 接種於副結核菌分離用培養基斜面，並以橡皮塞密封，置於攝氏三 十七度恆溫箱中培養三個月。 <p />三、副結核菌素皮內注射法 以副結核菌素○．二毫升，注射於頸側皮內，經四十八小時，使用直 徑測微尺測定注射局部之腫脹厚度與注射前同一局部厚度之差額，比 較判定之。 <p />四、補體結合反應 <br />（一）抗原：診斷用抗原以鎂生理食鹽水稀釋。 <br />（二）血清：供檢血清經攝氏五十六度三十分鐘非動化後以鎂生理食鹽水 稀釋成五倍、十倍、二十倍。 <br />（三）紅血球：百分之三綿羊血球液。 <br />（四）溶血素：抗綿羊紅血球血清三單位。 <br />（五）補體：兩單位。 <br />（六）反應溫度及時間：攝氏四至八度經十八至二十四小時。 <p />五、綜合判定標準 <br />（一）陽性： 1.臨床上呈現本病特有之徵狀，如慢性頑固性下痢，營養不良，泌 乳量降低等，且鏡檢法或培養法之結果呈抗酸性菌陽性者。 2.皮內注射反應腫脹差在三公厘以上且補體結合反應之血清稀釋倍 數於十倍或高於十倍時，顯示百分之百阻止溶血者。 <br />（二）疑陽性： 1.皮內注射反應腫脹差未達三公厘，且補體結合反應之血清稀釋倍 數於十倍或高於十倍時，顯示百分之百阻止溶血者。 2.皮內注射反應腫脹差在四公厘以上，且補體結合反應之血清稀釋 倍數於五倍時，顯示百分之五十以下阻止溶血者。 3.皮內注射反應腫脹差在三公厘以上，且補體結合反應之血清稀釋 倍數於五倍時，顯示百分之七五至百分之百阻止溶血者。 <br />（三）陰性： 1.皮內注射反應腫脹差在三公厘以下，且補體結合反應之血清稀釋 倍數於五倍或五倍以下，顯示百分之五十以下阻止溶血者。 2.皮內注射反應腫脹差在三公厘以上，四公厘以下，且補體結合反 應之血清稀釋倍數於五倍以下顯示百分之五十以下阻止溶血者。 <p />六、複檢 疑陽性者應於初檢後三個月再複檢一次，其結果仍呈疑陽性或轉呈陽 性者為陽性，轉為陰性者為陰性。